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DNA采血卡不同環境條件下血痕中微RNA穩定性研究
DNA采血卡的提取研究背景在法醫現場勘驗工作中常遇到不同種類的體液斑跡,如血痕、精斑、唾液斑、汗漬等,其中血痕是犯罪現場中最常見的生物檢材,也是法醫物證檢驗工作中最重要的檢測項目之一。血液一旦離開人體,便在載體上逐漸形成血痕(跡),且麵臨外界物理、化學以及生物學等多種因素的作用和影響,導致其汙染、降解、腐敗過程十分迅速。此外,隨著血痕的老化,其內部成分不斷發生改變,其中大分子蛋白質、DNA及RNA破壞會增加血痕檢驗的難度。故血痕的檢驗過程及難度也高於臨床血液檢驗,且血痕的腐敗嚴重影響其檢測結果,如何準確、高效地對遺留於犯罪現場中的血痕進行識別,是法醫檢案工作中必須解決的關鍵問題。MiRNA作為一類單鏈內源性非編碼小RNA分子(22個左右核苷酸),其表達具有高度的組織特異性和時序性,並且不易降解(強穩定性)等特征。這些優勢為應用於法醫工作中提供基礎,使其在法醫物證學檢測方麵(如體液、組織識別等)具有重要的意義和良好的應用前景,目前已有大量文獻證實可作為血液特異性分子標誌物。與此同時,miRNA雖具有較強的穩定性,但理論上而言,其仍會受到RNA酶的影響。既往臨床研究通常將血液樣本置於冰凍條件下保存來進行miRNA的穩定性研究,以找尋其最佳存儲條件。近年來有研究者將血液、精液、唾液等製作成體液斑跡後,初步探討其中miRNA的降解規律。而在法醫現場勘驗工作中遇到的生物檢材多為微量物證,且常存在於室內或室外(自然條件),甚至遭到人為破壞(水洗或高溫處理等);此外在法醫物證工作方麵,對生物檢材的長期保存是其重要工作之一。目前多在實驗室條件下(室溫、低濕、避光)保存,而該存儲條件對其中miRNA的穩定性的影響尚未可知。故探討不同環境條件下血痕樣本中miRNA的穩定性及時序性規律,判斷miRNA應用於體液來源鑒定方麵的潛力,進而確定血痕檢材的最佳存儲條件顯得尤為重要。
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